Evaluation of histological changes after tracheal occlusion at different gestational ages in a fetal rat model

OBJECTIVES: To evaluate the histological changes of tracheal cartilage and epithelium caused by tracheal occlusion at different gestational ages in a fetal rat model. METHODS: Rat fetuses were divided into two groups: a) External control, composed of non-operated rats, and b) Interventional group, composed of rats operated upon on gestational day 18.5 (term = 22 days), divided into triads: 1) Tracheal occlusion, 2) Internal control and 3) Sham (manipulated but not operated). Morphological data for body weight, total lung weight and total lung weight/body weight ratio were collected and measured on gestational days 19.5, 20.5 and 21.5. Tracheal samples were histologically processed, and epithelial, chondral and total tracheal thicknesses were measured on each gestational day. RESULTS: The tracheal occlusion group exhibited an increase in total lung weight/body weight ratio (p<0.001). Histologically, this group had a thicker epithelial thickness (p<0.05) and thinner chondral (p<0.05) and total tracheal thicknesses (p<0.001). These differences were more prominent on gestational days 20.5 and 21.5. CONCLUSION: Tracheal occlusion changed tracheal morphology, increased epithelial thickness and considerably decreased total tracheal thickness. These changes in the tracheal wall could explain the development of tracheomegaly, recently reported in some human fetuses subjected to tracheal occlusion.

Análise clínica, tomográfica e histológica comparativa entre BoneCeramic e Bio-Oss, utilizados como enxertos após a elevação da mucosa do seio maxilar em humanos: relato de caso clínico com desenho do tipo boca dividida, acompanhado durante oito meses / Clinical, tomographic and histological comparison of BoneCeramic and Bio-Oss used for sinus lift procedures in humans: case report of a split-mouth design with a 8-month follow-up

O objetivo deste estudo foi apresentar um caso clínico, suportado por achados tomográficos e histológicos, de regiões enxertadas com HA+β-TCP (hidroxiapatita + beta fosfato tricálcio, BoneCeramic) ou osso bovino inorgânico liofilizado (Bio-Oss), em um procedimento de elevação bilateral da mucosa do seio maxilar. A necessidade de enxerto ósseo, para viabilizar a instalação de implantes na maxila posterior foi comprovada pela altura óssea residual inferior a 5 mm, bilateralmente, avaliada por tomografia computadorizada de feixe cônico em paciente edêntulo total, usuário de prótese total convencional. Após a osteotomia de acesso ao seio maxilar e o descolamento da mucosa sinusal, foi realizado o preenchimento da cavidade com substituto ósseo bovino inorgânico liofilizado (Bio-Oss) na maxila direita e com HA+β-TCP (BoneCeramic) na maxila esquerda. Nova tomografia computadorizada foi realizada oito meses após o procedimento de enxertia, e demonstrou ganho de tecido mineralizado em altura nas regiões enxertadas, compatível com a instalação de implantes. No ato da instalação dos implantes foram obtidas biópsias das áreas enxertadas com auxílio de broca trefina. A análise histológica demonstrou que, nas áreas em que ambos os enxertos foram realizados, havia remanescente do biomaterial sempre rodeado por tecido ósseo neoformado e tecido conjuntivo mole. Entretanto, a análise qualitativa subjetiva sugere uma tendência maior de presença de material mineralizado quando o osso bovino inorgânico liofilizado (Bio-Oss) foi utilizado. Dentro do limite deste estudo, pôde-se concluir que ambos os materiais, quando utilizados em procedimentos de enxertia para aumento ósseo no assoalho do seio maxilar em humanos, foram capazes de promover o ganho em altura óssea, apresentando comportamento clínico e tomográfico semelhantes depois de oito meses.

The aim of this study was to report a clinical case, supported by CBCT and histological findings, of regions grafted with HA + β-TCP (hydroxyapatite + beta tricalcium phosphate, BoneCeramic) or inorganic bovine bone lyophilized (Bio-Oss) for bilateral maxillary sinus lifting. The need for bone grafting in the posterior maxilla was confirmed by residual bone heights of less than 5 mm, in a totally edentulous patient, wearing a conventional total prosthesis. After osteotomy and detachment of the sinus mucosa, the formed cavities were filled with Bio-Oss (right side) and BoneCeramic (left side). A new CBCT scan was performed eight months after grafting procedure, and demonstrated gain of mineralized tissue height in the grafted regions, consistent with placement implant. After installation of the implants, biopsies were retrieved from the grafted areas with the aid of a trephine bur. Histological analysis demonstrated that, remaining biomaterial particles were always surrounded by newly formed bone and soft tissue in both sides. However, the subjective qualitative analysis suggests the presence of a larger trend of mineralized material when lyophilized inorganic bovine bone (Bio-Oss) was used. Within the limits of this study, it can be concluded that both materials were able to promote significant gain in bone maxillary height after eight months.

Effect of nitrofen in the final stages of development of the diaphragm muscle in rats / Efeito do nitrofen na fase final do desenvolvimento da musculatura do diafragma em ratos

PURPOSE: To evaluate the expression of myosin in muscle fibers of the diaphragm in experimental congenital diaphragmatic hernia (CDH). METHODS: Fetuses of pregnant rats were divided into four groups: External Control (EC), composed of non-manipulated rats; Nitrofen, composed of pregnant rats that received 100 mg of nitrofen (2,4-dichloro-4'nitrodiphenyl ether) diluted in olive oil on gestational day (GD) 9.5, whose fetuses developed CDH (N+) or not (N-), and Olive Oil Placebo (OO), composed of pregnant rats that received the oil on the same GD. The fetuses were collected on GD 18.5, 19.5, 20.5 and 21.5 (term = 22 days). We obtained body weight (BW) and photographed the diaphragm area (DA), hernia area (HA) and subsequent calculated the HA/DA ratio in N+ group. Samples of Diaphragm muscle were processed for histological staining with H/E and immunohistochemistry (IHQ) for myosin.} RESULTS: The fetuses of N- and N+ groups had decreased BW and DA compared to EC and OO groups (p <0.001). HA was decreased on GD 18.5 compared to 21.5 (p <0.001) and the HA/DA ratio showed no difference. IHQ showed decreased expression of myosin in nitrofen groups. CONCLUSION: CDH induced by nitrofen model contributes to the understanding of muscularization in the formation of the diaphragm where the myosin expression is decreased.

OBJETIVO: Avaliar a expressão da miosina na muscularização do diafragma na hérnia diafragmática congênita (CDH) experimental. MÉTODOS: Fetos de ratas foram divididos em quatro grupos: Controle Externo (EC), composto de ratas não manipuladas; Nitrofen, composto de ratas que receberam 100 mg de nitrofen (2,4-dicloro-4'nitrodifenil éter) diluído no azeite no dia de gestação (GD) 9.5, cujos fetos desenvolveram CDH (N+) ou não (N-) e Placebo óleo de oliva (OO), composto de ratas que ingeriram apenas óleo no mesmo GD. Os fetos foram coletados com 18,5, 19,5, 20,5 e 21,5 GD (termo = 22 dias). Foi obtido o peso corporal (BW) e tiradas fotografias da área do diafragma (DA), da hérnia (HA) e calculada a relação HA/DA no grupo N+. Amostras de diafragmas foram processadas histologicamente para coloração com H/E e imunohistoquímica. RESULTADOS: Os fetos dos grupos N- e N+ tiveram BW e DA diminuídos em relação aos grupos EC e OO (p<0.001). Só houve diferença na HA entre os GD 18.5 e 21.5 (p<0.001) e a relação HA/DA não mostrou diferença entre os grupos. A imunohistoquímica mostrou menor expressão de miosina nos grupos que receberam nitrofen. CONCLUSÃO: O modelo de CDH induzida por nitrofen contribui para entender a muscularização na formação do diafragma onde a expressão da miosina está diminuída.

O uso de rhBMP-2 para aumento ósseo maxilar: relato de caso clínico / rhBMP-2 for maxillary bone augmentation: case report

A perda óssea na região anterior da maxila, por tratar-se de região estética, é um dos grandes desafios atuais da implantodontia. A estratégia mais indicada para o aumento ósseo dessa região, com o objetivo de reabilitação protética com implantes, é o emprego de enxerto ósseo autógeno. Alternativamente, outras metodologias de aumento ósseo têm sido utilizadas, tais como o enxerto ósseo homógeno, xenógeno, os biomateriais e diferentes associações destes materiais. Adicionalmente, grande atenção tem sido dada às Proteínas Ósseas Morfogenéticas (BMPs). principalmente à rh (recombinante humana) BMP-2, a qual foi caracterizada como um potente osteoindutor e alternativa em potencial ao enxerto ósseo autógeno, sem necessidade de associação com outros biomateriais. O objetivo deste estudo é apresentar um relato de caso clínico com a utilização da rhBMP-2.

The bone resorption in the anterior maxilla, due to its aesthetic importance, can be considered one of the challenges in implant dentistrv Autogenous bone graft is the most indicated bone augmentation procedure, aiming an implant supported rehabilitation .. Alternatively, some other graft procedures can be done with homogenous and xenogenous bone graft, biomaterials and different associations. Additionally to the mentioned biomaterials, the bone morphogenetic protein (BMP), specially the rhBMP-2, which was characterized as abone osteoinductor, and consecutively, a potential autogenous graft substitute, with previsibility and no necessity of association to other biomaterial. The objective of this study is to present a single case using the rhBMP-2 for bone augmentation.

Análise clínica, tomográfica e histológica comparativa entre (Boneceramic) isolado ou associado a proteínas derivadas do esmalte utilizadas como enxertos após a elevação da membrana do seio maxilar e colocação de implantes: estudo piloto / Clinical, tomographic, and histological analysis comparing (Boneceramic) alone or associated with enamel matrix derived proteins in sinus lifting procedures and dental implant placement: a pilot study

O objetivo deste estudo foi a avaliação clínica, tomográfica e histológica do uso do HA+β-TCP (Boneceramic) isolado ou associado a proteínas derivadas da matriz do esmalte (EMD) nos procedimentos de elevação da membrana do seio maxilar em humanos. Foram selecionados dois pacientes com rebordo ósseo residual entre 3 mm e 5 mm de altura (avaliados através de tomografia de feixe cônico) e que necessitavam de enxertos ósseos para viabilizar a instalação de implantes. Nesses pacientes, seis meses após as cirurgias de enxerto HA+β-TCP isolado ou associado com matriz do esmalte, foram instalados oito implantes (dois implantes em cada sítio enxertado). Neste momento, procedeu-se a coleta de uma biópsia óssea (utilizando-se uma trefina). A avaliação tomográfica mostrou ganho de material mineralizado em altura nas regiões previamente enxertadas, até uma média de 10,0 mm. A análise histológica demonstrou, para ambos os casos, tecido ósseo neoformado predominantemente lamelar, com densidade óssea e interconectividade das trabéculas ósseas neoformadas semelhantes entre os grupos estudados. Dentro do limite deste estudo pôde-se concluir que tanto o HA+β-TCP isolado como a sua associação ao EMD são capazes de promover ganho em altura óssea quando utilizados em procedimentos de enxertia para aumento ósseo no assoalho do seio maxilar em humanos, apresentando características clínicas, tomográficas e histológicas semelhantes

The aim of this study was to evaluate the clinical, tomographic, and histological similarity within the use of HA+β-TCP (Boneceramic) alone or associated with enamel matrix derived (EMD) proteins in sinus lifting procedures with subsequent dental implant placement. We selected two patients with residual bony ridges between 3 mm and 5 mm in height in need of bone grafts. Six months later, eight implants were installed (two implants at each site). Biopsies were made, and the tissue was processed and stained with HE solution. Tomographic evaluation showed bone height gain up to 10.0 mm on average. Histology showed new bone formation for both groups, with similar bone density and trabecular interconnectivity. It can be concluded that the HA+β-TCP graft isolated or associated to EMD provided bone height gain in sinus lifting procedures, with similar clinical, tomographic and histological characteristics.

Marcação imuno-histoquímica da resposta macrofágica e astrocitária no tronco encefálico de ratos Wistar submetidos ao modelo gliotóxico do brometo de etídio e tratados com ciclofosfamida / Immunohistochemical staining of the macrophagic and astrocytic response in the brainstem of Wistar rats submitted to the ethidium bromide gliotoxic model and treated with cyclophosphamide

O gliotóxico brometo de etídio (BE) foi utilizado para o estudo da resposta macrofágica e astrocitária sob imunossupressão com ciclofosfamida (CY). Investigou-se a imunorreatividade astrocitária à proteína glial fibrilar ácida (GFAP) e à vimentina (VIM), e a imunorreatividade macrofágica ao ED1 após injeção do BE. Foram utilizados ratos Wistar adultos injetados na cisterna basal com salina a 0,9 por cento (grupo I), BE a 0,1 por cento (grupo II) e BE a 0,1 por cento, imunossuprimidos com CY (grupo III). Fragmentos do tronco encefálico foram colhidos do 1° ao 21° dia pós-injeção para estudo imuno-histoquímico da GFAP, VIM e ED1. Nos grupos II e III, observou-se imunorreatividade aumentada para GFAP e re-expressão de VIM. No grupo II, células ED1-positivas foram observadas a partir do 2° dia e no grupo III, a partir do 3° dia. Aos 14 dias pós-injeção, havia mais células ED1-positivas no grupo III. A CY aparentemente não alterou a resposta astrocitária.

The gliotoxic ethidium bromide (EB) was used to study morphologically the macrophagic and astrocytic response under immunosuppression by cyclophosphamide (CY). Astrocyte immunoreactivity to glial fibrillary acidic protein (GFAP) and vimentin (VIM) and macrophagic immunoreactivity to ED1 were investigated after EB injection. Male Wistar rats were injected with 0.9 percent saline solution (group I), 0.1 percent BE (group II) and 0.1 percent EB associated with CY treatment (group III). Brainstem samples were collected from the 1st to the 21st day post-injection for GFAP, VIM and ED1 immunostaining. In groups II and III, it was observed increased immunoreactivity to GFAP and reexpression of VIM. In group II, ED1-positive cells were noted after the 2nd day and in group III, after the 3rd day. On the 14th day post-injection, it was observed a greater quantity of ED1- positive cells in group III than in group II. Apparently, CY did not change the astrocytic response pattern.

OSP-Immunofluorescent remyelinating oligodendrocytes in the brainstem of toxically-demyelinated Wistar rats

A remielinização do sistema nervoso central após desmielinização tóxica é um processo bem conhecido. No encéfalo, os oligodendrócitos remielinizam uma área maior do que na medula espinhal, onde as células de Schwann são preponderantes. Embora esses fatos sejam bem conhecidos, ainda não se conhece com certeza a origem das células remielinizantes. Esta investigação foi desenhada para esclarecer a participação de oligodendrócitos maduros na reconstrução das bainhas perdidas após a desmielinização induzida por brometo de etídio (BE) no tronco encefálico de ratos Wistar normais e imunossuprimidos com ciclosporina A. Trinta ratos fêmeas adultas foram divididos em três grupos experimentais. No grupo 1, os ratos receberam uma injeção de 10 mL de BE em 0,9% salina (n=10) na cisterna basal; no grupo 2, os ratos receberam a injeção de BE e foram tratados com ciclosporina A (n=10); no grupo 3 os ratos receberam uma injeção de 10 mL de 0,9% salina e foram tratados com ciclosporina A. Os ratos foram sacrificados aos 15, 21 e 31 dias após a injeção. A partir dos 15 dias muitas células da periferia das lesões tiveram marcação positiva para OSP (proteína específica do oligodendrócito), marcador de oligodendrócitos maduros e mielina. Assim, foi possível comprovar que células maduras da linhagem oligodendroglial participam do processo de remielinização neste modelo gliotóxico.

The usefulness of autopsies as a tool for teaching human embrilogy

Embryology is often difficult to teach because of the rapid, three-dimensional changes that occur simultaneously on a microscopic scale. A knowledge of normal and abnormal human development is important for understanding the pathophysiology, clinical treatment and surgical repair of malformations. In this study, we developed a method to enhance the comprehension of human embryology and its associated malformations. The strategy used macro-and-microscopical digital documentation of embryos, fetuses and neonates undergoing autopsy in the Department of Anatomical Pathology at the State University of Campinas. The images acquired were used in the Human Morpho-Physiology, course of the university´s medical curriculum. The embryology lectures were divided into two parts. In the first part, the development of the body´s structures was explained, while in the second, macro-and-microscopic images of selected autopsies were shown to the students, who were also encouraged to find and discuss the malformations and their clinical history, diagnosis and therapeutics. At the end of the course, the teaching material and the method used were evaluated using a questionnaire, interviews, and a test of the knowledge acquired during the lectures. Most of the students approved the method, and emphasized the importance of integration between basic and clinical disciplines. Their performance in the examination was also good

Revisão e proposta de nomenclatura para os biomater / Revision and nomenclature proposal for the biomaterials

Segundo a Sociedade Européia de Biomateriais, biomaterial é qualquer substância, droga, combinação de substâncias de origem natural ou sintética que pode ser usada por um período como parte de sistema tratado ou como reposição de algum tecido, órgão ou função do corpo. Contudo, hoje em dia, existe uma grande quantidade de nomenclatura sendo utilizada para os vários tipos de biomateriais, tornando difícil à comunicação e o entendimento para os profissionais da área. Assim esse trabalho tem por objetivo propor uma nomenclatura para esses materiais, bem como definir em quais situações clínicas devem ser utilizados

Ruptura da barreira hematoencefálica após injeçäo de droga gliotóxica no tronco encefálico de ratos wistar / Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats

O brometo de etídio (BE) determina desaparecimento astrocitário local, com ruptura da glia limitans e suposto dano na barreira hematoencefálica (BBB). Este estudo visou avaliar a integridade da BBB após injeçäo de soluçäo de BE a 0,1 por cento (grupo E) ou de salina a 0,9 por cento (grupo C) na cisterna pontis de ratos Wistar. Fragmentos do tronco encefálico foram coletados das 24 horas aos 31 dias pós-injeçäo para estudo ultra-estrutural e marcaçäo imuno-histoquímica para a GFAP. Alguns animais receberam carväo coloidal por via intravenosa nos mesmos períodos. Nos ratos do grupo C, näo houve sinal de perda astrocitária, nem extravasamento vascular de carväo no sítio da injeçäo. No grupo E, o desaparecimento astrocitário começou às 48 horas e algumas áreas estavam ainda destituídas de processos astrocíticos 31 dias após. Extravasamento de partículas de carväo nas lesöes foi visto de 48 horas até 7 dias, näo sendo detectada qualquer alteraçäo ultra-estrutural das junçöes oclusivas pela falta de astrócitos perivasculares

Behaviour of oligodendrocytes and Schwann cells in an experimental model of toxic demyelination of the central nervous system

Oligodendrocytes and Schwann cells are engaged in myelin production, maintenance and repairing respectively in the central nervous system (CNS) and the peripheral nervous system (PNS). Whereas oligodendrocytes act only within the CNS, Schwann cells are able to invade the CNS in order to make new myelin sheaths around demyelinated axons. Both cells have some limitations in their activities, i.e. oligodendrocytes are post-mitotic cells and Schwann cells only get into the CNS in the absence of astrocytes. Ethidium bromide (EB) is a gliotoxic chemical that when injected locally within the CNS, induce demyelination. In the EB model of demyelination, glial cells are destroyed early after intoxication and Schwann cells are free to approach the naked central axons. In normal Wistar rats, regeneration of lost myelin sheaths can be achieved as early as thirteen days after intoxication; in Wistar rats immunosuppressed with cyclophosphamide the process is delayed and in rats administered cyclosporine it may be accelerated. Aiming the enlightening of those complex processes, all events concerning the myelinating cells in an experimental model are herein presented and discussed

Desmielinizaçäo e remielinizaçäo após múltiplas injeçöes intramedulares de brometo de etídio em ratos Wistar / Demyelination and remyelination after multiple intramedullary injections of ethidium bromide in Wistar rats

O modelo de desmielinizaçäo do brometo de etídio foi utilizado para estudar a reaçäo do sistema nervoso central frente a múltiplos episódios de desmielinizaçäo tóxica. Foram utilizados 27 ratos Wistar, submetidos a 2, 3 ou 4 injeçöes de 1mul de soluçäo 0,1 por cento de brometo de etídio (19 ratos) ou de soluçäo salina 0,9 por cento (8 ratos) em diferentes pontos da medula espinhal. Os intervalos entre as injeçöes variaram de 28 a 42 dias. Dez dias após a última injeçäo os animais foram perfundidos com glutaraldeído 2,5 por cento. As medulas espinhais foram avaliadas pela macroscopia, microscopia óptica de cortes semifinos e microscopia eletrônica de transmissäo. As lesöes foram caracterizadas por desmielinizaçäo primária focal, com preservaçäo das estruturas vasculares, e variavam em tamanho e características histológicas. Remielinizaçäo pode ser observada, ou näo, de acordo com o tipo de lesäo. Como consequência das injeçoös múltiplas e sequenciais de brometo de etídio, o sistema nervoso central pareceu modificar sua capacidade de responder a um estímulo inflamatório, mas näo variou seu padräo de remielinizaçäo.